Laboratorieresultater: In-Situ-hybridisering (ISH)

Innholdsfortegnelse:

Laboratorieresultater: In-Situ-hybridisering (ISH)
Laboratorieresultater: In-Situ-hybridisering (ISH)

Video: Laboratorieresultater: In-Situ-hybridisering (ISH)

Video: Laboratorieresultater: In-Situ-hybridisering (ISH)
Video: FISH - Fluorescent In Situ Hybridization 2024, Mars
Anonim

Laboratorieresultater: In-Situ-hybridisering (ISH)

In-situ hybridisering - også kalt FISH (fluorescens in-situ hybridisering) eller CISH (kromogen-in-situ hybridisering) - er en spesiell medisinsk-diagnostisk prosedyre der det genetiske materialet i kroppens celler eller vev undersøkes. Spesielt med denne undersøkelsesmetoden kan endringer i humant genetisk materiale (DNA) brukes til å avklare arvelige, smittsomme sykdommer og svulstsykdommer.

Hovedområdet for anvendelse av in situ hybridisering er den videre diagnostiske opparbeidelsen i sammenheng med medfødte, genetiske sykdommer, virusinfeksjoner i celler og vev, ondartede svulstsykdommer, leukemi (ondartede sykdommer i blod og beinmarg) og ondartede lymfomer (ondartede sykdommer i lymfesystemet).

navigasjon

  • Fortsett å lese
  • mer om temaet
  • Råd, nedlastinger og verktøy
  • Hva er laboratorieprosedyren for in situ hybridisering (ISH)?
  • Hvordan fungerer en FISK-eksamen?
  • For hvilke sykdommer gjennomføres en ISH-undersøkelse?

Hva er laboratorieprosedyren for in situ hybridisering (ISH)?

In-situ hybridisering er en spesiell medisinsk diagnostisk prosedyre der genetisk materiale i kroppens celler eller vev undersøkes direkte på disse strukturene.

Grunnlaget for det genetiske materialet er et spesielt, svært komplekst og langkjedet molekyl:

"DNA" (deoksyribonukleinsyre)

Hos mennesker er det genetiske materialet som består av dobbeltstrenget DNA (to komplementære tråder) lokalisert i kjernen til alle kroppens celler, hvor alle kroppens celler til et individ har identisk genetisk materiale. I tillegg er den nøyaktige sammensetningen av hver persons individuelle genetiske sammensetning unik - sammenlignbar med fingeravtrykket, som også er unikt for hver person.

Av denne grunn kalles også genetisk materiale

såkalt”genetisk kode” fordi så å si blåkopien av alle kroppsstrukturer til en person er kartlagt, lagret og deretter arvet i denne formen i kryptert form

Innenfor cellekjernene i kroppens celler er DNA i en spesiell rekkefølge kjent som

  • "Kromosomer" (arvelige kropper) kalles. Kromosomer forekommer alltid parvis i menneskelige kroppsceller, med den ene arvet fra moren og den andre fra faren. Slik sett inneholder alle menneskekroppscellene totalt 46 kromosomer - 22 par såkalte autosomer og ett par såkalte sexkromosomer.
  • Kromosomene i seg selv består i stor grad av DNA, hvor enkelte seksjoner av DNA-sekvensen blir referert til som "gener", forutsatt at de kan tildeles en bestemt funksjon med hensyn til kroppens struktur og funksjon. Summen av alle gener kalles

    "Genomet" til mennesket

Ved hjelp av laboratorieprosessen med in situ hybridisering kan visse områder av genomet visualiseres direkte i celler og vev. Dette betyr at genetisk materiale (DNA) blir synliggjort direkte i cellens kjerne og deretter undersøkt og evaluert under mikroskopet. Navnet på denne laboratorieprosedyren er avledet av dette prinsippet:

"In-situ" betyr "direkte i strukturen som skal undersøkes"

Hvordan fungerer en FISK-eksamen?

Følgende komponenter kreves for å utføre en in situ-hybridisering:

  • et egnet testmateriale (celle- eller vevsprøver),
  • passende utstyr for klargjøring av ISH-preparater og
  • et deteksjonssystem (mikroskopisystem) for å vise (synliggjøre) det genetiske materialet i cellekjernene.

Etter at undersøkelsesmaterialet er innhentet, må cellen eller vevsmaterialet behandles:

  • Cellemateriale spres tynt på tynne glassplater (mikroskopglas).
  • Når det gjelder vevsprøver, brukes histologiske forberedelsesteknikker for å produsere tynne seksjonsprøver som også brukes på objektglass.

Ved å følge disse fremstillingstrinnene, etter denatureringstrinn for å oppnå enkeltstrenget DNA, blir preparatene belagt med såkalt

"Genprober" - disse er også denaturerte, enkeltstrengede DNA-sekvenser som fester seg til målsekvensene (hvis de er tilstede i testmaterialet) - med andre ord: "hybridiser"

For at hybridiseringsproduktene senere kan bli synlig for evalueringen, er DNA-sonder merket direkte eller indirekte med spesielle fargestoffer. Når det gjelder fargestoffer, er det

  • på den ene siden fluorescensfarging, hvorved spesielle fluorescensmikroskop må brukes for evaluering av tilsvarende preparater. Av denne grunn kalles også denne fargemetoden

    Betegner fluorescens in situ hybridisering (FISH)

  • på den annen side kan DNA-sonder også farges med enkle kromogener (fargestoffer), og et enkelt lysmikroskop er tilstrekkelig for å vise og evaluere preparater laget på denne måten. Denne teknikken kalles

    Chromogen In Situ Hybridization (CISH)

For hvilke sykdommer gjennomføres en ISH-undersøkelse?

Hovedområdet for anvendelse av in situ hybridisering er den ytterligere avklaring innenfor rammen av

  • medfødte, genetiske sykdommer,
  • Virusinfeksjoner i celler og vev,
  • ondartede svulstsykdommer,
  • Leukemi (ondartede sykdommer i blod og beinmarg) og
  • ondartet lymfom (ondartet sykdom i lymfesystemet).

Siden celle- eller vevsprøver blir analysert som undersøkelsesmateriale ved in-situ-hybridisering, kan denne laboratorieprosedyren bare utføres i passende utstyrte cytologiske eller histologiske laboratoriefasiliteter.

For mer informasjon om kreft, se Kreft.

Anbefalt: